建造PCR實驗室——設計建造PCR實驗室 WOL

1、建立樣品準(zhun)備區

這個區域專(zhuan)門用作樣品的(de)準備(bei)，在制備(bei)和操作用于核酸提取的(de)試劑時(shi)應(ying)該(gai)采取預防(fang)措施

2、樣(yang)(yang)品(pin)(pin)準(zhun)備(bei)和RNA-PCR RNA-PCR的(de)額(e)外步(bu)驟需要額(e)外的(de)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)操作，這樣(yang)(yang)增加(jia)了樣(yang)(yang)品(pin)(pin)之間污染(ran)的(de)機會。為了避免這一問題，反轉錄一步(bu)可以(yi)在樣(yang)(yang)品(pin)(pin)準(zhun)備(bei)區進行(xing)。在RNA-PCR中(zhong)應用UNG以(yi)防止污染(ran)的(de)方(fang)法(fa)也有報道。

3、建立前PCR區。

該去專(zhuan)門用于準(zhun)備(bei)各種反應(ying)，這個區域必須保持干凈，而且(qie)沒(mei)有來自克隆和樣品準(zhun)備(bei)的污(wu)染。前(qian)PCR區必須要有試劑(ji)和準(zhun)備(bei)，特別是(shi)專(zhuan)門用于前(qian)PCR區的正(zheng)壓活塞(sai)式(shi)移液管。

4、PCR實驗室試劑的操(cao)作。

5、在前(qian)PCR區建立(li)PCR混(hun)合物。

6、控(kong)制污染(ran)的方法(fa)。

已(yi)設(she)計出很有力(li)的酶學(xue)方(fang)法(fa)用(yong)來消除一(yi)種形式的污(wu)染-使用(yong)UNG，這一(yi)技(ji)術能(neng)有效(xiao)地消除由PCR產(chan)物引起的污(wu)染。另一(yi)種控制(zhi)污(wu)染的方(fang)法(fa)是使用(yong)紫外線，這種方(fang)法(fa)不(bu)能(neng)完*消除(chu)污染問(wen)題，但可以(yi)將(jiang)污染降(jiang)低幾個數量級。

7、后(hou)PCR區(qu)(qu)PCR完成(cheng)以后(hou)，需要分析樣品(pin)并解釋數(shu)據，應該留(liu)出一(yi)(yi)個專門用(yong)于(yu)(yu)反應后(hou)處理樣品(pin)的地方。后(hou)PCR活動中(zhong)使用(yong)的所用(yong)試劑(ji)(ji)、一(yi)(yi)次性耗(hao)材和儀器都(dou)必須(xu)是專門用(yong)于(yu)(yu)這(zhe)一(yi)(yi)目的，決不能把實驗室這(zhe)一(yi)(yi)區(qu)(qu)域的試劑(ji)(ji)或儀器用(yong)于(yu)(yu)任何(he)前PCR活動

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