PCR實驗(yan)室平(ping)面布局

原則上分為四個區域：試劑準備區、樣品制備區、擴增區和擴增產物分析區：

PCR實(shi)驗室(shi)原則上(shang)為試劑準備區、樣(yang)品制備區、擴增(zeng)區和擴增(zeng)產物分析區四個(ge)單獨的工(gong)(gong)作(zuo)區域(yu)(yu)并設(she)有專用走廊，各工(gong)(gong)作(zuo)區域(yu)(yu)應設(she)緩(huan)沖間(jian)，工(gong)(gong)作(zuo)區與(yu)緩(huan)沖間(jian)宜安裝連鎖裝置(zhi)。不(bu)同功能的工(gong)(gong)作(zuo)區應是分隔獨立(li)的，各工(gong)(gong)作(zuo)區有明顯的標志，不(bu)能直通，如果緊密相(xiang)連，需安裝物品傳遞窗。

PCR實驗室(shi)區域的(de)設置(zhi)并不是一(yi)成不變的(de)，以(yi)下幾種(zhong)情況需要說明：

1.如果(guo)樣(yang)本在擴增(zeng)(zeng)之前需(xu)要(yao)粉碎處理，則需(xu)要(yao)增(zeng)(zeng)加一個區域用于樣(yang)品的粉碎。

2.如果采(cai)用實時熒光(guang)PCR法，則擴增區和分析(xi)區可以合并為一個區。

3.如果采用全自動(dong)化(hua)PCR分析(xi)儀，則標本制備區(qu)、擴增區(qu)和分析(xi)區(qu)可以合并為一(yi)個(ge)區(qu)。

前(qian)兩(liang)區(qu)(qu)(qu)為擴(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)前(qian)區(qu)(qu)(qu)，后(hou)兩(liang)區(qu)(qu)(qu)為擴(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)后(hou)區(qu)(qu)(qu)，擴(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)前(qian)區(qu)(qu)(qu)與擴(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)后(hou)區(qu)(qu)(qu)應嚴格分開。實驗材料、試(shi)劑、記錄紙(zhi)、筆(bi)、清潔材料等，只能從擴(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)前(qian)區(qu)(qu)(qu)流(liu)向(xiang)(xiang)擴(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)后(hou)區(qu)(qu)(qu)，即從試(shi)劑準備(bei)區(qu)(qu)(qu)、樣(yang)品制備(bei)區(qu)(qu)(qu)到擴(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)區(qu)(qu)(qu)和(he)擴(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)產(chan)物分析區(qu)(qu)(qu)，不得(de)逆向(xiang)(xiang)流(liu)動(dong)(dong)。實驗室的氣流(liu)也應從擴(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)前(qian)區(qu)(qu)(qu)流(liu)向(xiang)(xiang)擴(kuo)增(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)(zeng)后(hou)區(qu)(qu)(qu)，不得(de)逆向(xiang)(xiang)流(liu)動(dong)(dong)。各工作區(qu)(qu)(qu)頂部應安裝紫外燈(deng)，紫外燈(deng)的波長為254nm，每20㎡一支(zhi)40W的紫外燈(deng)。

原則上的四大區域注意正壓負壓的控制：

1.試劑準備區：

主(zhu)要進行試(shi)劑(ji)的(de)制備(bei)(bei)、分裝和主(zhu)反(fan)應混合液的(de)制備(bei)(bei)。試(shi)劑(ji)和用于樣品制作的(de)材料(liao)應直接(jie)運送至(zhi)該(gai)區(qu)，不得經過其(qi)它(ta)區(qu)域。試(shi)劑(ji)原材料(liao)必須貯存在(zai)本(ben)區(qu)內(nei)，并在(zai)本(ben)區(qu)內(nei)制備(bei)(bei)成所需的(de)試(shi)劑(ji)。本(ben)區(qu)主(zhu)要設備(bei)(bei)有天平、冰箱、離(li)心(xin)機、加樣器、振蕩器等。

對于氣(qi)流壓力的(de)控制，本區并沒有(you)嚴格的(de)要(yao)求。

2.樣品制備區：

主要進行樣品的(de)(de)保存(cun)、核酸(RNA、DNA)提取、貯存(cun)及其加入至擴(kuo)增反應管和測定(ding)DNA的(de)(de)合成(cheng)。本(ben)區(qu)主要設(she)備有冰箱(xiang)、生物安(an)全柜、離(li)心機(ji)、加樣器(qi)、振蕩器(qi)、恒(heng)溫(wen)水浴(yu)等。

本(ben)區(qu)的壓(ya)力梯度(du)要求(qiu)為(wei)：相對于鄰近區(qu)域為(wei)正壓(ya)，以避(bi)免從鄰近區(qu)進入本(ben)區(qu)的氣溶膠(jiao)污染。

3.擴增區：

該區(qu)(qu)域的(de)(de)(de)功能是(shi)DNA擴增和擴增片段的(de)(de)(de)測定。此外，反應(ying)混(hun)合液(來自(zi)試劑貯存和制備區(qu)(qu))制備成反應(ying)混(hun)合液和已(yi)制備的(de)(de)(de)DNA模板(ban)(來自(zi)標(biao)本(ben)制備區(qu)(qu))的(de)(de)(de)加入等也可(ke)在本(ben)區(qu)(qu)內進(jin)行。對(dui)于氣(qi)流壓(ya)力的(de)(de)(de)控制，相對(dui)于鄰近(jin)區(qu)(qu)域為(wei)負壓(ya)，以(yi)避免氣(qi)溶膠從本(ben)區(qu)(qu)漏出。為(wei)避免氣(qi)溶膠所(suo)致的(de)(de)(de)污染，應(ying)盡量(liang)減少(shao)在本(ben)區(qu)(qu)內不必要的(de)(de)(de)走動。個(ge)別操作(zuo)如加樣等應(ying)在超凈臺(tai)內進(jin)行。

該區域的設備(bei)主要是核酸擴增(zeng)熱循(xun)環儀、加樣器、超凈(jing)臺等。其中熱循(xun)環儀的電源(yuan)應專用，并配(pei)備(bei)一個穩壓(ya)電源(yuan)或(huo)UPS，以防止(zhi)由于電壓(ya)的波(bo)動對擴增(zeng)測定的影(ying)響主要進(jin)行DNA擴增(zeng)。

本區的壓(ya)力梯度要(yao)求為(wei)：相對于鄰近區域為(wei)負壓(ya)，以避(bi)免氣溶膠(jiao)從本區漏出(chu)。

4.擴增產物分析區：

擴增產物的測定。本區(qu)主要設備(bei)有(you)酶標儀、洗板機、加樣(yang)器和(he)水浴箱等(deng)。

本區(qu)(qu)的壓力梯(ti)度的要求為(wei)：相對于鄰近區(qu)(qu)域為(wei)負壓，以避免擴增產物從本區(qu)(qu)擴散(san)至(zhi)其它區(qu)(qu)域。

PCR無菌核酸檢測實驗室 設計裝修——PCR無菌核酸檢測實驗室 設計裝修